Kuinka voit määrittää katalaasiaktiivisuuden kasvien lehdissä?

Katalaasiaktiivisuuden määrittäminen kasvilehdissä

Katalaasi on kasveista ja muista organismeista löydetty entsyymi, joka katalysoi vetyperoksidin (H2O2) hajoamista veteen ja happea. Katalaasiaktiivisuus voidaan mitata kasvilehdissä seuraamalla hapentuotannon nopeutta.

Materiaalit:

* Tuoreet kasvilehdet

* Vetyperoksidiliuos (H2O2) (3%)

* Lasitestiputket

* Stoppers

* Valmistunut sylinteri

* Sekuntikello

* Turvallisuussuojat

Menettely:

1. Kerää useita tuoreita kasvilehtiä.

2. Leikkaa lehdet pieniksi paloiksi terävällä veitsellä tai saksilla.

3. Aseta 5 g lehtikudosta lasi -koeputkeen.

4. Lisää 10 ml 3 -prosenttista vetyperoksidiliuosta koeputkeen.

5. Pysäytä koeputki nopeasti ja käynnistä sekuntikello.

6. Tarkkaile ajanjaksoa, joka kuluu lehtikudoksen tuottamiseksi riittävästi happea koeputken täyttämiseksi kokonaan.

7. Tallenna aika sekunneissa.

Laskelmat:

Lehtikudoksen katalaasiaktiivisuus voidaan laskea käyttämällä seuraavaa kaavaa:

katalaasiaktiivisuus =(ML:ssä tuotettu hapen tilavuus)/(aika sekunneissa)

esimerkki:

Jos lehtikudos tuottaa 10 ml happea 30 sekunnissa, katalaasiaktiivisuus olisi:

katalaasiaktiivisuus =(10 ml)/(30 s) =0,33 ml/s

tulkinta:

Kasvien lehtien katalaasiaktiivisuus voi vaihdella kasvilajista riippuen, lehtien iästä ja ympäristöolosuhteista. Yleensä korkeampi katalaasiaktiivisuus liittyy suurempaan vastustuskykyyn oksidatiiviselle stressille.

turvatoimenpiteet:

* Käytä turvasalaa suojaamaan silmiäsi.

* Vetyperoksidi on syövyttävä aine. Käsittele sitä huolellisesti ja vältä kosketusta ihoasi ja vaatteisiin.

* Jos vetyperoksidi joutuu kosketuksiin ihon tai silmien kanssa, huuhtele vedellä heti.