Koko :Glofish-uros on yleensä suurempi kuin naaras, mutta tämä ei aina ole luotettava indikaattori.
Vartalon muoto :Glofish-uros on yleensä hoikkampi, kun taas naarailla on pyöreämpi vartalo.
Väritys :Glofish-naaras on yleensä väriltään kirkkaampi kuin urosglofish. Näin ei kuitenkaan aina ole, ja jotkut urospuoliset glofishit voivat olla melko kirkkaanvärisiä.
Käyttäytyminen :Glofish-uros on yleensä aggressiivisempi kuin naaras, etenkin pesimäkaudella. Glofish-uros voi myös käyttäytyä alueellisella tavalla, kuten ajaa muita kaloja pois alueeltaan.
On tärkeää huomata, että nämä ovat vain yleisiä ohjeita, ja joitakin poikkeuksia saattaa olla. Paras tapa määrittää Glofishin sukupuoli on neuvotella pätevän akvaarioasiantuntijan kanssa.