Tässä on vaiheittainen selitys siitä, kuinka uros- ja naarasopossumit pariutuvat:
1. Koskelu: Pesimäkauden aikana urosopossumi seurustelee naaraan jahtaamalla sitä, haistelemalla hänen ympärillään ja antamalla erilaisia ääniä.
2. Tuoksumerkintä: Urosopossumi merkitsee alueensa ja naaraan myskin tuoksulla houkutellakseen häntä ja kertoakseen kiinnostuksestaan.
3. Kloaakin suudelma: Kun naaras on vastaanottavainen, hän laskee vartalonsa maahan ja esittelee kloaakansa. Urosopossumi kohdistaa kloaakansa hänen kanssaan ja osallistuu prosessiin, joka tunnetaan nimellä kloaakin suudelma.
4. peniksen erektio: Kloakaan suutelemisen aikana urosopossumin penis nousee pystysuunnassa ja työnnetään naaraan kloakaan. Opossumin penis on suhteellisen pitkä ja kärjestä haarautunut, mikä mahdollistaa sisäisen hedelmöittymisen.
5. Siittiönsiirto: Urosopossumi siirtää siittiönsä naaraan kloakaan kloakaan suudelman aikana. Siittiöt kulkevat sitten naaraan lisääntymiskanavan läpi hedelmöittääkseen munasolut.
6. Erotus: Onnistuneen siittiöiden siirron jälkeen uros- ja naarasoposumit eroavat toisistaan. Naarasopossumi kantaa ja synnyttää poikasia ilman uroksen apua.
Opossumit ovat tunnettuja korkeasta lisääntymisasteestaan, sillä naaraat synnyttävät useita pentueita vuodessa. Opossumien tiineysaika on suhteellisen lyhyt, noin 12-13 päivää, ja naaras voi tuottaa jopa 20 poikasta yhdessä pentueessa.